Luettu:31 Kirjoittaja:Sivustoeditori Julkaisuaika: 2022-12-05 alkuperä:paikka
DNA: n, RNA : n ja proteiinien uutto on molekyylibiologiassa käytetty perusmenetelmä. Nämä biomolekyylit voidaan eristää mistä tahansa biologisesta materiaalista seuraavaa alavirran prosessointia, analyyttisiä tai preparatiivisia tarkoituksia varten. Aikaisemmin nukleiinihapon uutto- ja puhdistusprosessi oli monimutkainen, aikaa vievä, työläs ja yleinen läpäisy oli rajoitettu. Tällä hetkellä on saatavana monia erikoistuneita menetelmiä puhtaiden biomolekyylien, kuten ratkaisupohjaisten ja pylväspohjaisten protokollien, uuttamiseen. Manuaaliset menetelmät ovat kulkeneet pitkän matkan ajan, ja erilaisiin kaupallisiin tuotteisiin sisältyy kokonaisia sarjoja, jotka sisältävät suurimman osan nukleiinihappojen eristämiseksi tarvittavista komponenteista, mutta suurin osa näistä vaatii toistuvia sentrifugaatiovaiheita, joita seuraa supernatantin näytteen tyypin poistaminen ja lisämekaaninen prosessointi. Viime vuosina keskisuurille ja suurille laboratorioille on suunniteltu kasvava kysyntä automaatiojärjestelmille. Se on vaihtoehto työvoimavaltaisille manuaalisille menetelmille.
Mikä on tärkein ero DNA: n uuttamisen ja RNA: n uutteen välillä DNA/RNA -uuttolaitteessa?
Mitkä ovat DNA: n uuttamisen ja RNA: n uuttamisen spesifiset vaiheet?
Mikä on funktion DNA/RNA -uuttolaite?
Tärkein ero DNA: n ja RNA: n uuttamisen välillä on pH -taso. DNA: n uuttamiseen tarvitaan 8 pH: n ja RNA: n uuttamiseen tarvitaan pH 4,7. DNA: lla on taipumus denatuuriin ja pääsemään orgaaniseen faasiin happamassa pH: ssa. RNA: n emäksinen hydrolyysi emäksisessä ympäristössä tapahtuu 2 'OH: n riboosissa. Lisäksi on olemassa toinen tärkeä ero. RNA -uuttoprosessi puhdistaa RNA: n, kun taas DNA: n uuttoprosessi puhdistaa DNA: n. DNA: n uuttoprosessi etenee näiden vaiheiden läpi - membraaniproteiinien ja lipidien katabolismi, kataboliittien aggregaatio konsentroituneessa suolaliuoksessa ja DNA: n saostuminen etanolin läsnä ollessa. Tämä 3-vaiheinen prosessi voi sisältää kaksi valinnaista vaihetta
RNA -puhdistusprosessi koostuu 4 erillisestä vaiheesta - solujen hajoamisesta, proteiinien denaturoinnista, RNA: n eristämisestä lisäämällä kloroformia ja fenolia ja pesemällä pelletti etanolilla. RNA -uutto on RNA: n puhdistaminen biologisista näytteistä. Ribonukleaasin esiintymisen vuoksi kudoksissa ja soluissa prosessi muuttuu monimutkaiseksi. Ribonukleaasin käyttö voi nopeasti hajottaa RNA: ta. Yleisesti käytetty menetelmä RNA-uuttoon on guanidiinitiosyanaatti-fenoli-kloroformiuutto. Sentrifugoinnin ja vaiheen erottelun periaatteen perusteella
DNA: n uutto, johon sisältyy DNA: n erottaminen ja puhdistaminen, on kemiallinen ja fysikaalinen prosessi. DNA -näytteet voidaan saada parafiinikudoksen lohkoista, veren, kudosnäytteistä (jäädytetty), ja se tapahtuu seuraavissa vaiheissa - solujen hajoamisessa, DNA: n eristämisessä ja saostumisessa, kun solut ovat hajotettuina, konsentroituneet suolaliuokset edistävät katabolisten molekyylien aggregaatiota. Sitten liuos sentrifugoitiin DNA: n erottamiseksi roskien rypäleistä, jotka on erilaistunut DNA, yhdistetään soluihin ja etanolin saostumiseen käytettyihin suoloihin ja reagensseihin voidaan käyttää edelleen puhdistamiseen.
DNA/RNA -uuttolaitteen tehtävänä on eristää ja puhdistaa nukleiinihapot DNA: ta ja RNA: ta näytteestä. Tämä voidaan tehdä käyttämällä erilaisia menetelmiä, mutta yleisin on käyttää entsyymejä proteiinien ja muiden näytteen läsnä olevien solukomponenttien hajottamiseen. Kun nukleiinihapot on eristetty, niitä voidaan käyttää moniin tarkoituksiin, kuten sekvensointiin tai PCR: ään.
Vuoteen 2022 mennessä Bioteke on 51 valtuutettua patenttia ja 12 ohjelmiston tekijänoikeutta. Se on läpäissyt ISO13485 -laadunhallintajärjestelmän sertifikaatin.