Tietoja antigeenitestiin kolloidisten kultaratkaisujen valmistelusta

Kolloidisen kultaliuoksen valmistus antigeenitestiä varten ottaa Trisodium -sitraatin pelkistysmenetelmän kolloidisen kultaliuoksen valmistelemiseksi. Ota 1000 ml ultrapuraa vettä ja lämmitä se kiehumiseen magneettiseen sekoitimeen, lisää 40 ml 1% kloorohapihappoliuosta, kun liuos kiehuu uudelleen, lisää nopeasti 36 ml 1 -prosenttista trisodium -sitraattiliuosta, jatka, kun liuoksen väri muuttuu violetti 5 -minin jälkeen, sammuta lämmitin ja sammuta lämmitin. Kolloidisten kultahiukkasten keskimääräinen halkaisija ja zeetapotentiaali mitattiin nanohiukkasten koon analysaattorilla ja varastoitiin huoneenlämpötilassa pimeässä. Joten mitä tietoja antigeenitestiin kolloidisten kultaratkaisujen valmistelusta? Katsotaanpa.

Tässä on sisältöluettelo:

l Kolloidisen kullan merkittyjen konjugaattien valmistus

l Nopea antigeenitestiliuskojen valmistus

l Pienin havaitsemisraja

L Stability Test

KOLLOIALINEN KULTA -MERKITTÄVÄT Konjugaattien valmistus

Ota vastaavasti 100 ml antigeenitesti kolloidista kultaa kahteen puhtaan dekantteriin, optimoitujen merkittyjen pH-olosuhteiden mukaan 3,3 ml ja 2,1 ml 0,1 mol/l: n kaliumkarbonaattia pH: n säätämiseksi, sekoita magneettisen sekoittajan kanssa 300 r/min 10 minuutin ajan ja lisää hiiren anti-N-proteiini-monokloninen vasta-aineet ja DNP-BSA-proteiinit. Lisättiin 2 ml 10% BSA -liuosta ja lisättiin 2 ml 10% BSA -liuosta, ja sekoitusta jatkettiin 20 minuutin ajan; Sekoituksen jälkeen antigeenitesti kolloidinen kultaliuos siirrettiin kahteen 50 ml: n sentrifugiputkeen, asetettiin sentrifugiparametrit 9000 r/min, 20 min ja 4 ° C ja sentrifugointi suoritettiin. Sentrifugoinnin jälkeen ota sentrifugiputki pois varovasti, älä ravista, poista supernatantti pipetillä, kerää sakka, palauta se konjugaatin laimennelmaan 10 ml: iin ja säilytä 4 ° C: ssa pimeässä. Antigeenitestin keskimääräinen halkaisija ja Zeta -potentiaali kolloidisten kultakonjugaattihiukkasten mitattiin nanohiukkasten koko -analysaattorilla.

Nopeiden antigeenitestiliuskojen valmistus

Näytetyyny päällystettiin tasaisesti näytteentyynynkäsittelyliuoksella, ja kunkin lasikuidun päällystysmäärä oli 30 ml ja kuivattiin 50 ° C: ssa 24 tunnin ajan. Laimenna nopea antigeenitesti Kolloidinen kultaleimatut hiiren anti-N-proteiini-monoklonaalinen vasta-aine ja kolloidinen kultaleimatun DNP-BSA-proteiinikonjugaatti konjugaatin laimennus, tilavuussuhde on vastaavasti 18% ja 20%, ja kohtelu laimennetulla kolloidisella kullan konjugaatilla oli yhdensuuntainen. kuivattu 45 ° C: ssa 24 tuntia. Hiiren anti-N-proteiinin monoklonaalinen vasta-aine ja kanin anti-DNP-polyklonaalinen vasta-aine laimennettiin PBS: llä, joka sisälsi 0,01 mol/L pH7,4 ja 5% trehaloosia pitoisuuteen 2,0 mg/ml ja 1,0 mg/ml, vastaavasti. Tunnistuslinjana (T -viiva) ja laadunvalvontalinjana (CLINE) sieppausvasta -aine päällystettiin nitroselluloosakalvolla (NC -kalvo) ja kuivattiin 45 ° C: ssa 48H: n ajan. Valmistettu NC-kalvo, konjugaattityyny, näytetyyny ja veden imeytymisalusta liitettiin PVC: n pohjalevyyn vuorotellen, leikattiin 3 mm/raitaksi kaltevalla, laitettiin korttikoteloon ja pakattu alumiinifoliopussiin. Aseta testin aikana nenänielun nenänkylmäkelloon esiasennettuun nostoputkeen, joka on esillä uuttoliuoksella (10 mmol/LPBS, pH7,4, 1%NP-40) ja lisää 3 tippaa (100 μl) tipastaan testikortin näytteen reikään 15S: n uuttamisen jälkeen. 15MIN -reaktioaika visuaalisen tulkinnan saavuttamiseen. Antigeenitesti T-linja ja Cline ovat molemmat positiivisia, T-linja ei ole värillinen, Cline on negatiivinen, Cline ei ole värillinen, mikä osoittaa, että testiliuska on tehokas ja se on testattava uudelleen.

Vähimmäistunnistusraja

Vähimmäistunnistusrajatutkimukset suoritettiin lämpötapetuilla virusviljelmillä. Antigeenikokeen negatiivisena matriisina käytettiin terveiden ihmisten nenänielun nenänkylvistä swappeja. Ensinnäkin suoritettiin 10-kertainen kaltevuuslaimennus. Nopean antigeenitestin negatiivisen tuloksen jälkeen edellinen konsentraatio oli silloin 2-kertainen kaltevuuden laimennus ja vähintään 19 kertaa 20 testistä oli positiivinen. Konsentraatiotasoa (≥95%) käytettiin reagenssin minimin havaitsemisrajana.

Stabiilisuustesti

Aseta valmistettu antigeenitestivalmis reagenssikortti 50 ° C: n uuniin ja testi korkealla ja alhaisella pitoisuuden laadunvalvonta -aineilla kahden viikon välein. Toista testi 3 kertaa jokaiselle näytteelle. Ero kaistan syvyydessä korkean lämpötilan nopeutetun tuhoamisreagenssin ja kontrollireagenssin välillä yhden viikon ja 8 viikon ajan.

Yllä oleva on asiaankuuluva tieto kolloidisen kultaliuoksen valmistuksesta antigeenitestiin. Jos olet kiinnostunut COVID-19: n nopeasta antigeenitestistä , SARS-COV-2 Rapid-antigeenitestistä, voit ottaa meihin yhteyttä. Verkkosivustomme on www.bioteeke.cn.